Простой способ культивации (технология с кейсингом).

В нашем случае, будут использоваться 720 мл (800 г) банки, из-под огурцов, или помидоров. (Подойдут любые похожие банки,
необязательно использовать именно такие).

Снимаем металлическую крышку и, используя любой предмет округлой формы, (например крышку от бутылки), очерчиваем на ее поверхности
круг, диаметром 20–30 мм.

Затем, используя обычные ножницы, вырезаем в крышке отверстие.

После того, как мы вырезали отверстие, необходимо загнуть его края внутрь. Это можно сделать тупым, деревянным предметом, 
например скалкой, или ручкой от чего-либо, прилагая усилия в двух направлениях, (вниз и вбок).

Если все сделано правильно, должно получиться что-то вроде этого:

Изготовление ватно-марлевого тампона.
Теперь необходимо изготовить ватно-марлевый тампон. Для этого отрезаем бинт или кусок марли (бинт должен быть довольно широким,

Кладем на бинт кусок ваты (ваты должно быть много, чтобы тампон получился достаточно плотным).

Поднимаем края бинта, и перевязываем их веревкой (если используется нитка, то ее необходимо сложить в несколько слоев).

После этого, обрезаем излишки бинта и веревки.

Готовый тампон, вставляем в проделанное нами отверстие,в крышке банки. Тампон необходимо вставить таким образом, 
чтобы с обеих сторон крышкион выступал одинаково, (т.е. необходимо расположить крышку примерно по центру

После того, как мы вставили тампон в отверстие, необходимо, одновременно, сильно прижать его ладонями сверху и снизу. 
Это делается для того, чтобы края тампона заходили дальше краев отверстия, что в свою очередь, предотвратит попадание 
бактерий через зазор между тампоном и крышкой.

Для того чтобы исключить попадание бактерий, тампон должен быть плотным,
чем плотней он будет, тем меньше вероятность проникновения бактерий (но
перебарщивать тоже не стоит, иначе воздух не сможет проходить сквозь тампон).
Тампон делают, примерно в 1.5 раза большего размера, чем размер отверстия,
в которое он будет вставляться.

Банка с тампоном выглядит так:

ПРИГОТОВЛЕНИЕ ЗЕРНА

В нашем случае будет использоваться зерно пшеницы

Помимо пшеницы, для выращивания грибов P. cubensis, с успехом можно использовать
и другие виды субстрата, например рожь, пшено, гречку, перловку, рис, овес, корм
для птиц, сено, солому и т.д. Вообще, спектр используемых субстратов довольно широк,
и определяется в первую очередь, личными предпочтениями человека, выращивающего
грибы

Перепробовав практически все, вышеперечисленные виды субстрата, я остановил свой выбор все-таки на пшенице.

Зерно необходимо предварительно отварить.
На каждую используемую нами банку, потребуется 150–170мл (не грамм) зерна. Необходимое количество, легко определить, 
используя для этой цели мерный стаканчик.

Зерно, насыпаем в кастрюлю или ковшикв том объеме, который потребуется для приготовления необходимого нам количества банок.

Заливаем водой.

И ставим вариться на плиту.

Варить зерно до готовности*, нужно примерно 30–40 мин. (все зависит от количества).

Зерно считается готовым тогда, когда на поверхности появляются отдельные,
разваренные зерна, их должно быть немного, примерно 5–7% от общей массы.

Вода к этому времени, практически полностью выкипает.

После того, как зерно сварилось, его необходимо промыть холодной водой.

Cначала вода будет мутно-коричневой, а потом станет совершенно прозрачной. Это делается для того, чтобы зерно не слипалось.

Затем воду нужно полностью(!) слить, а зерно разложить по банкам.

Если все сделано правильно, зерно будет занимать, примерно 1/2 объема банки.

Теперь, банки с зерном, необходимо стерилизовать. Для стерилизации лучше использовать скороварку, но также подойдет и 
обычная кастрюля.

Перед стерилизацией, на дно кастрюли, необходимо положить кусок тряпки, или
использовать какую-нибудь другую “подставку” (например, перевернутую тарелку),
для того, чтобы банки не соприкасались с дном кастрюли, и не лопнули во время
стерилизации. Воду в кастрюлю, следует наливать таким образом, чтобы она закрывала
нижнюю часть банок, и чтобы она не выкипела за то время, пока банки будут стерилизоваться.

Оптимальное время стерилизации 1 час.

Банки лучше не вынимать из скороварки или кастрюли до тех пор, пока они полностью не остынут. Если банки 
вынуть сразу же после стерилизации, из-за разницы давления, они начнут затягивать в себя холодный воздух, 
а это может привести к тому, что вместе с воздухом, внутрь банки попадут микроорганизмы, которые в дальнейшем 
могут вызвать заражение субстрата.

После стерилизации, банки с субстратом должны остыть до комнатной температуры, (инокуляцию лучше проводить спустя сутки (гарантированный срок) после окончания стерилизации).

После стерилизации, зерно еще немного увеличилось в размере, и теперь занимает примерно 2/3 от объема банки.

Нигде в банке, не должно присутствовать ни какой свободной воды, а зерно должно выглядеть сухим и при постукивании кулаком по банке, легко рассыпаться на отдельные зерна.

Если все так – значит, все было сделано правильно.

ИНОКУЛЯЦИЯ

Инокуляция готовым шприцом со споровой взвесью.

Если вы используете уже готовый шприц со споровой взвесью, то процесс инокуляции не должен вызвать особых проблем.
Благодаря тому, что субстрат и споровая взвесь остаются в герметично закрытых емкостях, для проведения инокуляции не 
требуется предварительная стерилизация помещения, в котором вы будете проводить работы. Так же можно обойтись без 
применения резиновых перчаток и марлевой повязки на лицо (хотя конечно, все эти меры предосторожности,существенно 
снижают риск заражения субстрата).

Берем банку и обильно смачиваем тампон спиртом, но так, чтобы спирт не начал капать на зерно.

После этого, берем приготовленный шприц со споровой взвесью, и прокаливаем иглу над пламенем горелки.

Иглу необходимо прокалить докрасна.

Затем опускаем иглу в банку со спиртом, (это делается для того, чтобы остудить иглу и не прожечь ей тампон).

И тут же, прокалываем смоченный спиртом тампон и впрыскиваем некоторое количество споровой взвеси в банку с зерном. 
Для инокуляции одной банки, достаточно 2–3 мл. споровой взвеси.

Следите за тем, чтобы игла прошла тампон насквозь, и ее кончик показался
внутри банки. Если этого не произойдет, то все споры окажутся в тампоне.

Если по каким-либо причинам тампон проколоть не удается, инокуляцию можно провести, аккуратно приоткрыв крышку банки (перед инокуляцией банку необходимо протереть спиртом).

Инокуляция субстрата, кусочком агара обросшим мицелием.

Для проведения такой инокуляции, потребуется предварительная стерилизация помещения, а также необходимо будет использовать 
резиновые перчатки и марлевую повязку на лицо.

Стерилизацию помещения необходимо проводить в течении30–60 минут с помощью специальной бактерицидной лампы, приобрести её можно тут

После стерилизации, в помещение рекомендуется заходить спустя 10–15минут. Входить в помещение, необходимо с уже надетыми 
перчатками и повязкой.

Протираем спиртом перчатки, инструменты и все рабочие поверхности:

Стол, банки, чашку Петри и т.д.

Когда все готово к проведению инокуляции, берем скальпель, опускаем его в спирт и прокаливаем над пламенем горелки.

Поскольку скальпель толще иглы, нет необходимости прокаливать его докрасна – достаточно просто подержать скальпель над пламенем горелки, в течении 10–15 секунд.

Затем, также как и в случае с иглой, опускаем скальпель обратно в спирт.

После этого снова, подносим скальпель к горелке для того, чтобы находящийся на его поверхности спирт загорелся. И пока спирт 
горит, несем скальпель к чашке Петри, в которой находится мицелий.

За это время, спирт на скальпеле должен как раз сгореть до конца, если этого не произошло, просто потрясите немножко скальпелем и пламя потухнет.

Дальше, немного приоткрыв крышку чашки Петри, вырезаем скальпелем кусочек агара размером примерно 1 квадратный см. 

Накалываем его на кончик скальпеля, и закрыв чашку Петри несем к банке с зерном.

Немного приоткрыв крышку банки, бросаем кусочек агара внутрь, на зерно, просто постучав скальпелем по краю банки. И тут же 
закрываем крышку обратно.

Чтобы крышка открылась легко, ее следует 
отвернуть заранее, а потом неплотно прикрыть.

Совершенно неважно, упал ли кусочек агара мицелием вниз, (на зерно), или наоборот.

Не нужно пытаться его перевернуть, тряся банку. Так можно добиться того, что агар прилипнет к стенке банки, и отделить его,будет 
намного труднее. Если инокуляция прошла успешно, через некоторое время, агар обрастет мицелием со всех сторон и мицелий 
благополучно переберется на зерно.

Общие рекомендации.

Все операции по инокуляции, следует проводить быстро, действовать уверенно и не волноваться. Лучше заранее, потренироваться 
вырезать кусочки агара, и научится стряхивать их в банку. Это можно сделать и на специально приготовленном для этих целей “пустом” 
агаре, и на ненужном зараженном агаре.

Следует не слишком широко открывать крышки, и закрывать их тут же, после проведения необходимых операций. 
Правильно держать руки и инструменты сбоку, а не НАД открытыми поверхностями субстрата и агара. Помните, что со всех предметов вниз падают бактерии, которые в дальнейшем, могут вызвать заражение.

УХОД ЗА БАНКАМИ

После инокуляции, банки с зерном необходимо убрать в темное и теплое (25–30С) место. Поскольку присутствие света даже в небольших количествах тормозит развитие мицелия, если у вас нет возможности убрать банки в темное место их следует обернуть фольгой или каким-нибудь другим светонепроницаемым материалом.

Через 2–3 дня после инокуляции, (если инокуляция прошла успешно), кусочек агара начнет обрастать пухом мицелия, а в местах соприкосновения с зерном мицелий начнет перебираться на субстрат.

Мицелий растет довольно быстро и с каждым днем осваивает все большую поверхность субстрата, перебираясь по зернам и образовывая полностью заросшие участки.

Как только мицелий начал активно распространяться по субстрату, и появились полностью обросшие участки из нескольких зерен, субстрат можно “перетряхнуть”.

Во время перетряхивания, обросший мицелием участок субстрата разбивается на отдельные зерна, которые, попадая в новые места, образуют сразу несколько новых очагов развития мицелия – это существенно сокращает время освоения мицелием субстрата, и способствует более равномерному его зарастанию.

Но, поскольку большая часть зерна еще не обросла мицелием и риск ее заражения еще слишком велик, перетряхивать субстрат следует очень аккуратно. При перетряхивании, нужно следить за тем, чтобы зерно как можно меньше касалось крышки банки и самого тампона. В этих местах могут находиться посторонние микроорганизмы пробравшиеся “из вне” которые могут привести к заражению субстрата. Следует не “трясти” банку из стороны в сторону, а удерживая её в одной руке, другой рукой наносить удары по нижней части банки.

Таким образом, субстрат будет перемешиваться внизу банки, почти не попадая в ее верхнюю часть.
Сразу после перетряхивания субстрата, зёрна обросшие мицелием теряют свою “пушистость” и их практически невозможно отыскать в общей массе.

Но уже через 1–2 дня на некоторых зёрнах, становятся видны белые точки мицелия, которые быстро увеличиваются в размере и перебираясь на соседние зерна завоевывают новые территории.

Через несколько дней, мицелий разрастается по субстрату и снова образовывает полностью заросшие участки.

Когда это произошло, перетряхивание субстрата следует повторить.

С каждым новым перетряхиванием субстрата, очагов развития мицелия становиться все больше.

И зарастание происходит все быстрее.

Для полного обрастания субстрата мицелием, обычно требуется3–5 недель, в зависимости от температуры окружающего воздуха.

Чем меньше остается неосвоенного мицелием субстрата, тем меньше риск его заражения при перетряхивании.

Но все равно, перетряхивать субстрат следует как можно аккуратней, т.к. если заражение все-таки произойдет, субстрат придется выбросить, а банку придется заново стерилизовать. И будет очень обидно, если это случиться уже в самом конце колонизации субстрата.

Если заражение субстрата все же произошло, субстрат из этой банки необходимо выбросить. Некоторые виды плесени содержат токсины и могут быть очень опасны для здоровья человека. Поэтому зараженный субстрат проще выкинуть и приготовить все заново.

Нормальный цвет мицелия – белый, допускаются лишь белый цвет с легким голубоватым или желтоватым оттенком. Нормальный запах мицелия – грибной, но запах мицелия практически не чувствуется, его можно почувствовать либо сразу после перетряхивания субстрата (уже на завершающей стадии, когда почти все зерно обросло мицелием), либо при перекладывании субстрата из банки в контейнер. Все другие цвета и запахи – признак заражения субстрата.

Полностью обросшее мицелием зерно выглядет так:

После того, как субстрат будет полностью (!) колонизирован мицелием, его можно пересыпать в контейнеры для стимуляции плодоношения.

ПРИГОТОВЛЕНИЕ ПОКРОВНОГО ГРУНТА

Покровный грунт готовится из смеси торфа и вермикулита в соотношении 2 / 1 соответственно.
Берем подходящую емкость и насыпаем в нее 2 части торфа.

Затем туда же насыпаем одну часть вермикулита.

Затем все это перемешиваем до получения однородной массы.

Теперь покровный грунт необходимо увлажнить. Для этого добавляем в нашу смесь воду. Обычно для достижения оптимальной влажности, воды требуется примерно столько же, сколько вермикулита (1 часть), может быть чуть больше.

Тщательно перемешиваем до получения однородной массы.

Влажность покровного грунта легко проверить, сжав его в кулаке. Если при этом между пальцами выступают капли воды – значит влажность оптимальная, если капли не выступают – воды следует немножко добавить, если вода вытекает ручьями – в смесь следует добавить вермикулита, либо торфа (вермикулит лучше впитывает влагу).

После того, как смесь приготовлена, покровный грунт необходимо стерилизовать. Для этого накладываем его в банку.

Закрываем банку крышкой (крышку можно закрывать плотно, поскольку покровный грунт довольно рыхлый, при избыточном давлении банка не взорвется).

Ставим ее в скороварку.

И стерилизуем в течение 30–60 минут. После стерилизации, покровная смесь должна остыть до комнатной температуры, (использовать покровный грунт, лучше спустя сутки после окончания стерилизации).

ПОКРОВ

Теперь, нам необходимо пересыпать обросший мицелием субстрат в пластиковый контейнер и «укрыть» его покровным грунтом.

Все операции необходимо проводить в стерильных условиях, работая в резиновых перчатках и марлевой повязке. Все рабочие поверхности перед началом работы необходимо протереть спиртом.

В нашем случае будет использоваться обыкновенный, пластиковый контейнер для пищевых продуктов емкостью 1.1 л.

Протираем контейнер спиртом (изнутри и снаружи).

Затем, предварительно протерев спиртом банку с субстратом, открываем крышку и высыпаем зерно обросшее мицелием в контейнер.

Для того, чтобы крышка банки легко открылась, ее необходимо отвернуть
заранее, а потом неплотно прикрыть и протереть спиртом

---

Для того, чтобы зерно легко высыпалось из банки, зерно необходимо предварительно 
«разбить» (т.е. проделать то же самое, что и при перетряхивании субстрата).

Затем, разламывая крупные куски мицелия, более-менее выравниваем поверхность.

После этого, предварительно протерев спиртом банку с покровным грунтом, «укрываем» субстрат, насыпая грунт слоем 2–3 см.

Не прижимая грунт (!) более-менее выравниваем поверхность.

Покровный грунт должен выглядеть “воздушным” и не образовывать крупных комков, если комки все же присутствуют их необходимо удалить, либо просто измельчить. Мицелия, не должно быть видно на поверхности покровного слоя. Если это вдруг произошло, присыпьте это место грунтом.

Теперь необходимо обернуть контейнер фольгой. Удобней всего, проделывать это в следующей последовательности:

• Расстилаем фольгу, ставим на нее контейнер

• и оборачиваем его сверху:

• Затем отрезаем фольгу от рулона и загибаем ее с одной стороны:

• После этого поднимаем все края и загибаем их к верху:

Теперь контейнер(ы) необходимо убрать в темное и теплое место сроком на 1 неделю. Поскольку фольга не пропускает свет, контейнеры достаточно поставить в помещение с температурой 25–30С. Через неделю, мицелий пробьется сквозь покровный грунт, и контейнер можно будет выставлять в парник, для начала плодоношения.